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| 導(dǎo)讀 | 質(zhì)譜技術(shù) (mass spectrometry) 是分離和檢測(cè)帶電粒子質(zhì)荷比的分析技術(shù)。隨著離子源及質(zhì)量分析器技術(shù)的變革、質(zhì)譜儀器設(shè)計(jì)的快速改進(jìn)等，質(zhì)譜技術(shù)已成為化學(xué)分析領(lǐng)域和生命科學(xué)領(lǐng)域非常有效的分析工具，尤其在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用越來越為廣泛和深入。 |
質(zhì)譜技術(shù) (mass spectrometry) 是分離和檢測(cè)帶電粒子質(zhì)荷比的分析技術(shù)。隨著離子源及質(zhì)量分析器技術(shù)的變革、質(zhì)譜儀器設(shè)計(jì)的快速改進(jìn)等，質(zhì)譜技術(shù)已成為化學(xué)分析領(lǐng)域和生命科學(xué)領(lǐng)域非常有效的分析工具，尤其在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用越來越為廣泛和深入。
由于質(zhì)譜技術(shù)的高特異性、高靈敏度、單次分析的快速性與檢測(cè)信息的豐富性，以及對(duì)復(fù)雜生物基質(zhì)分析的高耐受性等特點(diǎn)，臨床研究和診斷工作也逐漸倚重于此類重要的新型檢測(cè)技術(shù)。如：質(zhì)譜技術(shù)所能提供的豐富的檢測(cè)信息，有助于臨床更加完整地了解疾病和病理狀態(tài)，從而為患者提供更為全面和準(zhǔn)確的診療服務(wù)。
在美國等發(fā)達(dá)國家，質(zhì)譜技術(shù)已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，基于該技術(shù)開發(fā)出的臨床檢測(cè)項(xiàng)目已有數(shù)百項(xiàng)，但我國目前仍處于起步階段，檢測(cè)項(xiàng)目有70余項(xiàng)；應(yīng)用覆蓋面非常廣泛，涵蓋了罕見和高難度分析，包括微生物鑒定、生化檢驗(yàn)（激素檢測(cè)、藥物濃度監(jiān)測(cè)、遺傳性疾病檢測(cè)、營養(yǎng)素檢測(cè)等) 和分子生物診斷 (蛋白組學(xué)、核苷酸多態(tài)性、代謝組學(xué)) [1-5]；應(yīng)用范圍也在逐步擴(kuò)展，從生化檢驗(yàn)、微生物鑒定，到代謝組學(xué)、脂質(zhì)組學(xué)、蛋白組學(xué)，再到參考測(cè)量程序的建立和校準(zhǔn)品賦值，乃至術(shù)中應(yīng)用及床旁檢測(cè)。
本文將全面闡述質(zhì)譜技術(shù)在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中的發(fā)展歷程，以及在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的主要應(yīng)用情況和特點(diǎn)，同時(shí)剖析了質(zhì)譜技術(shù)目前在臨床應(yīng)用中主要痛點(diǎn)和未來可能的發(fā)展方向，希望能較為全面地綜述質(zhì)譜技術(shù)臨床應(yīng)用的現(xiàn)狀與未來。
一、質(zhì)譜技術(shù)在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中的發(fā)展
從質(zhì)譜技術(shù)初進(jìn)入醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域，至今發(fā)展至多領(lǐng)域、寬范圍的應(yīng)用，大約經(jīng)歷了四十年的時(shí)間，早始于20世紀(jì)80年代。由于免疫法檢測(cè)存在假陽性，質(zhì)譜技術(shù)開始從研究性實(shí)驗(yàn)室走入臨床實(shí)驗(yàn)室，如氣相色譜質(zhì)譜 (gas chromatography mass spectrometry, GC-MS) 技術(shù)起初應(yīng)用于軍事藥物監(jiān)測(cè)。推動(dòng)這種轉(zhuǎn)變出現(xiàn)的是發(fā)生在1981年的美國尼米茲號(hào)航空母艦事故。尼米茲號(hào)是美國一艘核動(dòng)力航空母艦，1981年5月25日深夜，尼米茲號(hào)在準(zhǔn)備回收模擬作戰(zhàn)歸來的機(jī)群時(shí)發(fā)生意外，引發(fā)大火，該事故終造成多人死傷。隨后采用免疫法檢測(cè)飛行員尿液樣本時(shí)發(fā)現(xiàn)，大部分尿檢結(jié)果中da麻代謝物呈陽性，表明軍中可能存在藥物濫用情況。
因免疫法檢測(cè)結(jié)果本身存在較高的假陽性率，所以需要使用更為特異的GC-MS方法進(jìn)行確認(rèn)。而GC-MS在應(yīng)用后的10年里使大麻檢測(cè)陽性率從18%降低至8%，這也促使了質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)入毒理實(shí)驗(yàn)室并應(yīng)用于濫用藥物檢測(cè)和治療藥物監(jiān)測(cè)，臨床質(zhì)譜檢測(cè)開始萌芽。1988年，美國聯(lián)邦藥品檢驗(yàn)局發(fā)布強(qiáng)制性指南，要求治療藥物監(jiān)測(cè)必須使用質(zhì)譜法進(jìn)行確認(rèn)，奠定了質(zhì)譜技術(shù)在治療藥物監(jiān)測(cè)中的重要地位[2]。
隨著GC-MS在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域應(yīng)用的逐步增多，免疫法用于類固醇激素檢測(cè)的缺點(diǎn)也日益凸顯，尤其是在測(cè)定婦女和兒童體內(nèi)低濃度睪酮時(shí)。但因GC-MS主要適用于揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性化合物，樣品制備程序復(fù)雜，檢測(cè)通量低，因此限制了其在臨床中的應(yīng)用。20世紀(jì)80年代，快原子轟擊、電噴霧和輔助激光解析等“軟電離”技術(shù)的發(fā)展，使蛋白質(zhì)、酶、核酸等生物大分子的檢測(cè)成為可能，大大拓展了質(zhì)譜技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用范圍[1]。
20世紀(jì)90年代，串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)開始應(yīng)用于新生兒篩查。而電噴霧電離接口技術(shù) (electrospray ionization interface technology, ESI) 發(fā)展使得兩種強(qiáng)有力的分析工具—液相系統(tǒng)和質(zhì)譜系統(tǒng)的結(jié)合成為了可能，兩者的結(jié)合也進(jìn)一步促進(jìn)了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 (liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS) 技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、臨床研究及疾病診斷的應(yīng)用發(fā)展。液相色譜質(zhì)譜技術(shù)的聯(lián)用能夠使非揮發(fā)性和熱不穩(wěn)定生物分子電離并在極低的濃度下得到檢測(cè)，簡(jiǎn)化了樣品制備流程，提高了檢測(cè)通量，極大縮短了報(bào)告周期，因而在臨床實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)工作中得到了迅猛的發(fā)展。
21世紀(jì)初期，質(zhì)譜技術(shù)開始嘗試應(yīng)用于感染性疾病的檢測(cè)，如血源性感染疾病的分子診斷。基質(zhì)輔助激光解吸電離技術(shù) (matrix-assisted laser desorption/ionization, MALDI) 的發(fā)展則地實(shí)現(xiàn)了生物大分子的軟離子化，通過引入基質(zhì)分子，使待測(cè)分子不產(chǎn)生碎片，解決了非揮發(fā)性和熱不穩(wěn)定性生物大分子解吸離子化的問題，便捷地將生物樣本引入質(zhì)譜系統(tǒng)，并結(jié)合飛行時(shí)間質(zhì)量分析器 (time-of-flight, TOF) 技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了微生物的快速鑒定分析，鑒定時(shí)間可縮短1.45d。相對(duì)于傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法，MALDI-TOF可節(jié)省人力和時(shí)間，該應(yīng)用也促進(jìn)了質(zhì)譜技術(shù)在大分子檢測(cè)領(lǐng)域的廣泛使用，將質(zhì)譜的應(yīng)用推上了一個(gè)新的臺(tái)階。
2013年，美國食品藥品監(jiān)督管理局 (Food and Drug Administration, FDA) 認(rèn)可使用MALDI-TOF對(duì)微生物進(jìn)行鑒定。另外，近幾年還出現(xiàn)了將質(zhì)譜技術(shù)用于實(shí)時(shí)指導(dǎo)癌癥外科手術(shù)的前沿應(yīng)用[2,5]。
在我國，質(zhì)譜技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用早也始于治療藥物監(jiān)測(cè)。隨后，質(zhì)譜技術(shù)在遺傳代謝病檢測(cè)、營養(yǎng)素檢測(cè)和微生物鑒定工作中作出的突出貢獻(xiàn)，引起行業(yè)內(nèi)的廣泛關(guān)注。同時(shí)其在蛋白組學(xué)等研究領(lǐng)域也具有良好的前景，有望成為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域繼基因測(cè)序技術(shù)之后的下一個(gè)革命性技術(shù)。
二、質(zhì)譜技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的主要應(yīng)用
1、質(zhì)譜技術(shù)在臨床生化檢驗(yàn)中的應(yīng)用
質(zhì)譜技術(shù)在應(yīng)用較早的國家已成為繼免疫學(xué)方法和化學(xué)發(fā)光法之后的第三大生化檢測(cè)技術(shù)。目前采用質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)的項(xiàng)目數(shù)量雖然與其他兩種方法相比還有很大差距，但越來越多的生化檢測(cè)項(xiàng)目正被轉(zhuǎn)移至質(zhì)譜技術(shù)平臺(tái)進(jìn)行檢測(cè)；質(zhì)譜技術(shù)也成為生化檢驗(yàn)領(lǐng)域新興的發(fā)展方向和*的重要技術(shù)[6]。
質(zhì)譜技術(shù)在臨床生化檢驗(yàn)中應(yīng)用為成熟的項(xiàng)目主要包括：生化遺傳檢測(cè)、治療藥物監(jiān)測(cè)、類固醇激素檢測(cè)、營養(yǎng)素檢測(cè)以及毒理學(xué)檢測(cè)。技術(shù)高特異性的特點(diǎn)可有效避免結(jié)構(gòu)類似物對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，為臨床提供更準(zhǔn)確的結(jié)果，提高患者的依從性。技術(shù)高靈敏度的特點(diǎn)可在很大程度上彌補(bǔ)內(nèi)分泌類固醇激素檢測(cè)中，低濃度化合物檢測(cè)困難和測(cè)不準(zhǔn)的難題，為疾病的預(yù)測(cè)和診療分型提供準(zhǔn)確結(jié)果。
國外許多內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)將大部分體內(nèi)激素類物質(zhì)的檢測(cè)由放射免疫學(xué)方法或免疫學(xué)方法轉(zhuǎn)換為LC-MS/MS方法，并將質(zhì)譜技術(shù)作為內(nèi)分泌類固醇激素類物質(zhì)檢測(cè)的優(yōu)選方法。質(zhì)譜技術(shù)一次可檢測(cè)多種化合物的特點(diǎn)，可提高檢測(cè)通量、減少樣品用量和降低檢測(cè)成本。如在生化遺傳檢測(cè)中，質(zhì)譜技術(shù)一次可分析60多種氨基酸和酰基肉堿，篩查40余種新生兒遺傳代謝病；在營養(yǎng)素檢測(cè)中一次可分析20種氨基酸、20種脂肪酸、10余種微量元素或5種脂溶性維生素，有效提高了檢測(cè)通量、減少了樣品用量，并提供了豐富的檢測(cè)信息；在毒理學(xué)檢測(cè)中一次可檢測(cè)尿液中19種藥物，實(shí)現(xiàn)了高通量、快速的藥物篩查技術(shù)[7]。
在臨床生化檢驗(yàn)領(lǐng)域，質(zhì)譜技術(shù)相比于傳統(tǒng)方法的優(yōu)勢(shì)較為突出，但隨著技術(shù)的深入應(yīng)用與經(jīng)驗(yàn)的積累，技術(shù)應(yīng)用的缺點(diǎn)也逐步凸顯出來，包括質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用的陷阱問題、實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)行過程中的管理問題以及相關(guān)政策法規(guī)問題等，主要體現(xiàn)在：
(1) 質(zhì)譜技術(shù)在分析基質(zhì)復(fù)雜的生物樣本時(shí)，檢測(cè)結(jié)果易受到基質(zhì)效應(yīng)、結(jié)構(gòu)類似物干擾以及質(zhì)譜信號(hào)產(chǎn)生的不穩(wěn)定所帶來的干擾影響；對(duì)這些問題認(rèn)識(shí)和預(yù)防不當(dāng)，則質(zhì)譜的檢測(cè)結(jié)果將存在較大的錯(cuò)誤風(fēng)險(xiǎn)；
(2) 質(zhì)譜技術(shù)相比于免疫學(xué)方法和化學(xué)發(fā)光法，檢測(cè)的自動(dòng)化程度較低，對(duì)人員依賴性較大；同時(shí)各廠家儀器系統(tǒng)還未實(shí)現(xiàn)與臨床實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng) (LIS) 的接口雙向?qū)樱跀?shù)據(jù)處理和報(bào)告發(fā)放環(huán)節(jié)，仍未實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化；
(3) 對(duì)于質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用較成熟的項(xiàng)目，檢測(cè)數(shù)據(jù)仍缺乏統(tǒng)一的應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)[4]；
(4) 質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)方法所需的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、試劑和耗材等，目前主要依賴于進(jìn)口，較多的檢測(cè)項(xiàng)目受限于這些因素而開展受阻；
(5) 目前質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)室的方法基本為自建方法，標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化較為薄弱。美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)已發(fā)布了臨床質(zhì)譜的使用指南[8]，中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì)、衛(wèi)生計(jì)生委臨床檢驗(yàn)中心和《中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》編輯部也于2017年10月份共同發(fā)布了《液相色譜-質(zhì)譜臨床應(yīng)用建議》[9]，這些都為質(zhì)譜技術(shù)臨床檢測(cè)工作提供良好了的指導(dǎo)和參考；
(6) 由于質(zhì)譜技術(shù)較為復(fù)雜，儀器構(gòu)成多樣化，在實(shí)際的應(yīng)用過程中，需要有經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)技術(shù)人才進(jìn)行規(guī)范的使用操作，但目前國內(nèi)相關(guān)的技術(shù)人才匱乏；質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備昂貴，對(duì)于安裝條件有特殊要求，建設(shè)需要投入大量的資金；這些使得質(zhì)譜技術(shù)臨床應(yīng)用的門檻較高，一定程度上限制了技術(shù)的應(yīng)用；
(7) 在日常運(yùn)營過程中儀器的維修服務(wù)成本較高，維修周期較長，維修的及時(shí)性也存在不能滿足臨床檢測(cè)的報(bào)告周期固定性的要求；
(8) 國內(nèi)對(duì)于質(zhì)譜技術(shù)在臨床的應(yīng)用監(jiān)管還不成熟，相關(guān)的檢測(cè)項(xiàng)目在臨床上無收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)，也在一定程度上限制了技術(shù)的應(yīng)用普及。
雖然質(zhì)譜技術(shù)的應(yīng)用仍存在較多缺陷，但隨著技術(shù)的革新與發(fā)展，應(yīng)用監(jiān)管的成熟，各項(xiàng)瓶頸將被不斷突破，未來隨著質(zhì)譜儀器的各項(xiàng)性能的提升；前處理自動(dòng)化的實(shí)現(xiàn)；檢測(cè)數(shù)據(jù)自動(dòng)輸出并實(shí)現(xiàn)與實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)的雙向?qū)樱约敖Y(jié)果報(bào)告自動(dòng)預(yù)警功能的實(shí)現(xiàn)，質(zhì)譜儀有望像免疫學(xué)方法和化學(xué)發(fā)光法一樣，成為臨床生化檢驗(yàn)中自動(dòng)化、智能化、易用化的檢測(cè)平臺(tái)。
2、質(zhì)譜技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用
近年來，MALDI-TOF技術(shù)已成功應(yīng)用于微生物的鑒定及分型，并逐漸成為微生物鑒定的主流技術(shù)，可快速檢測(cè)和鑒定革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、厭氧菌、分枝桿菌、酵母菌和絲狀真菌等[6,10-14]。相比于傳統(tǒng)的革蘭染色、菌落形態(tài)、表型鑒定及分子生物學(xué)技術(shù)， MALDI-TOF技術(shù)具有快速、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、高通量等優(yōu)點(diǎn)。MALDI-TOF是基于細(xì)菌表面蛋白分子檢測(cè)的技術(shù)，通過測(cè)定未知微生物自身*的蛋白質(zhì)指紋圖譜及特征性的圖譜峰，并與數(shù)據(jù)庫中參考菌株的蛋白指紋圖譜進(jìn)行比對(duì)，從而實(shí)現(xiàn)菌株的鑒定[11]。
該技術(shù)是將完整的微生物細(xì)胞直接進(jìn)行檢測(cè)，樣品制備簡(jiǎn)單，檢測(cè)周轉(zhuǎn)時(shí)間短，在數(shù)分鐘內(nèi)就可以得到一個(gè)菌種的測(cè)試結(jié)果，且分析用菌量極少，而傳統(tǒng)方法完成常規(guī)細(xì)菌鑒定至少需要8~18h或更長時(shí)間。MALDI-TOF通過檢測(cè)細(xì)菌胞膜成分或表達(dá)的特異蛋白對(duì)細(xì)菌進(jìn)行種群的鑒別，敏感性和準(zhǔn)確性高，可以區(qū)分表型相似或相同的菌株，提供屬、種、型水平的鑒定，對(duì)臨床常見分離菌鑒定到種水平的準(zhǔn)確率很高。以16S r RNA基因測(cè)序結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，質(zhì)譜檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確率為90.0%~95.0%[15]，不僅可以識(shí)別病原菌，而且有助于發(fā)現(xiàn)新的病原菌。此外，質(zhì)譜技術(shù)還用于病原體的藥物敏感性檢測(cè)，常規(guī)的藥物敏感性實(shí)驗(yàn)方法比較費(fèi)時(shí)，局限于少數(shù)細(xì)菌，MALDI-TOF通過比對(duì)耐藥菌株和藥物敏感菌株間的特征性蛋白和圖譜峰及檢測(cè)耐藥菌株與抗生素共培養(yǎng)后的分解產(chǎn)物，可以分析幾乎所有的耐藥機(jī)制。
研究表明，相比于標(biāo)準(zhǔn)的微生物培養(yǎng)技術(shù)，質(zhì)譜技術(shù)可降低約50%的試劑成本和勞動(dòng)力成本[16]。但是，MALDI-TOF作為一項(xiàng)新興技術(shù)，在微生物鑒定方面也存在著一定的局限性。如對(duì)于具有特殊結(jié)構(gòu)的菌種和圖譜極為相似的菌種的鑒定區(qū)分存在一定的難度、對(duì)于一些罕見菌種或新型細(xì)菌鑒定困難、對(duì)血培養(yǎng)樣本中的混合菌種難以準(zhǔn)確鑒別等，原因是質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫中標(biāo)準(zhǔn)菌株的圖譜有限、質(zhì)譜峰的數(shù)據(jù)不充分以及細(xì)菌庫中無這些菌株[17,18]。
隨著儀器技術(shù)參數(shù)、質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫及分析軟件的不斷更新完善，所有的分離株將被逐步的明確鑒定出來。因此，隨著質(zhì)譜技術(shù)在臨床微生物實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用數(shù)據(jù)庫進(jìn)一步完善，MALDI-TOF技術(shù)必將在微生物鑒定、菌種分型、同源分析、耐藥監(jiān)測(cè)等多方面發(fā)揮出更大作用，有望成為新一代病原微生物診斷的常規(guī)技術(shù)。
3、質(zhì)譜技術(shù)在核酸檢測(cè)中的應(yīng)用
核酸質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)是在MALDI-TOF原理的基礎(chǔ)上，結(jié)合引物延伸分析法和堿基特異裂解分析法，針對(duì)雙鏈DNA的特性進(jìn)行了特殊優(yōu)化，使樣品在電離過程中不產(chǎn)生或產(chǎn)生較少的碎片離子，可用于檢測(cè)核酸的分子量和研究基因組單核苷酸多態(tài)性 (single nucleotide polymorphism, SNP) ，是近年來應(yīng)用于臨床核酸檢測(cè)的新型軟電離生物質(zhì)譜[19]。相比于以凝膠電泳為基礎(chǔ)的測(cè)序法，質(zhì)譜技術(shù)具有分辨率高、分離速度快、雜質(zhì)干擾少的優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于核酸測(cè)序、核酸指紋圖譜、核酸SNP分析等[20]。
SNP是指基因組DNA序列上某個(gè)位置單個(gè)核苷酸堿基的差異，即基因位點(diǎn)的突變，在人群中的發(fā)生頻率大于1%，是決定個(gè)體疾病易感性和藥物反應(yīng)性差異的重要因素，通過分析突變的位點(diǎn)，可預(yù)測(cè)疾病，并提供診斷意見和指導(dǎo)用藥。MALDI-TOF分析檢測(cè)SNP是根據(jù)不同的分子量將等位基因排序，區(qū)分和鑒別相對(duì)分子量達(dá)7000左右 (含20多個(gè)堿基) 、僅存在1個(gè)堿基差別的不同DNA，可以地分辨到堿基種類。
藥物代謝酶遺傳多態(tài)性是產(chǎn)生藥物毒副作用、降低或喪失藥物療效的主要原因之一，通過檢測(cè)藥物代謝酶的基因型可對(duì)臨床用藥方案進(jìn)行指導(dǎo)和調(diào)整，為臨床個(gè)體化用藥提供依據(jù)。以往檢測(cè)藥物代謝酶基因多態(tài)性通常采用化學(xué)法，依賴于核苷酸的互補(bǔ)性對(duì)核酸序列進(jìn)行分析，對(duì)于序列的長度、復(fù)雜性、反應(yīng)條件等都具有較高的要求，容易受到不同程度的化學(xué)因素干擾，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差。若能將化學(xué)和物理方法結(jié)合起來對(duì)藥物代謝酶基因進(jìn)行檢測(cè)，將極大提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
MALDI-TOF是藥物代謝酶基因多態(tài)性的新型檢測(cè)方法，其根據(jù)核苷酸分子被電離后在真空管中的飛行時(shí)間來確定其分子量大小，終確定核苷酸序列，檢測(cè)結(jié)果僅僅依賴于核酸分子量。經(jīng)過驗(yàn)證比較，MALDI-TOF檢測(cè)結(jié)果與Sanger測(cè)序的結(jié)果符合率為100%[21,22]。傳統(tǒng)的Sanger測(cè)序方法雖然是序列測(cè)定的金標(biāo)準(zhǔn)，但其操作步驟繁瑣費(fèi)時(shí)和試劑成本高等限制了其臨床應(yīng)用。MALDI-TOF可通過一次實(shí)驗(yàn)檢測(cè)多個(gè)標(biāo)本的多個(gè)突變，實(shí)現(xiàn)基因型的高通量、快速檢測(cè)，為個(gè)體化用藥提供更加多樣化的檢測(cè)手段。
4、質(zhì)譜技術(shù)在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用
質(zhì)譜技術(shù)可檢測(cè)蛋白質(zhì)的氨基酸組成、分子量、多肽或二硫鍵的數(shù)目與位置及蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象等，從而實(shí)現(xiàn)未知肽段的篩選、測(cè)序、肽指紋圖譜、蛋白質(zhì)表達(dá)譜、蛋白質(zhì)翻譯后修飾譜、全蛋白完整無損分析等。質(zhì)譜多樣化的前端連接方式極大地促進(jìn)了研究者對(duì)基礎(chǔ)蛋白科學(xué)領(lǐng)域的認(rèn)識(shí)，但將這些認(rèn)識(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)閷?duì)臨床實(shí)踐的有效信息則有相當(dāng)大的難度。到目前為止，基于質(zhì)譜技術(shù)的將蛋白組學(xué)多樣性的蛋白和多肽標(biāo)志物， 成功應(yīng)用于臨床檢測(cè)的案例并不多見[22]。
相反，對(duì)于已知的、確定的多肽和蛋白標(biāo)志物即目標(biāo)蛋白組學(xué)，質(zhì)譜技術(shù)得到了較好的應(yīng)用。目前，已經(jīng)有一些關(guān)于LC-MS/MS用于臨床目標(biāo)多肽和蛋白分析的文章發(fā)表，如甲狀腺球蛋白 (Tg) 和淀粉樣蛋白的鑒定與定量分析等[23-25]。質(zhì)譜技術(shù)在這一領(lǐng)域的應(yīng)用，在很多情況下均可為臨床提供有價(jià)值的信息[21]，如對(duì)某一分析物的免疫學(xué)方法不存在時(shí)；已經(jīng)存在的免疫學(xué)方法不能給出某些臨床關(guān)鍵問題的答案時(shí)；已經(jīng)存在的免疫學(xué)方法存在干擾時(shí)；某一分析物存在多個(gè)異構(gòu)體時(shí)；對(duì)同一分析物的檢測(cè)，不同的檢測(cè)方法間存在較大的結(jié)果變異性時(shí)；已經(jīng)存在的分析方法流程較為復(fù)雜時(shí)，質(zhì)譜技術(shù)均可發(fā)揮相應(yīng)作用，彌補(bǔ)免疫學(xué)方法的不足。
質(zhì)譜技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域中應(yīng)用的下個(gè)目標(biāo)和挑戰(zhàn)，是如何彌補(bǔ)免疫學(xué)方法在蛋白和多肽檢測(cè)方面的局限性。相信隨著技術(shù)的發(fā)展，這方面的突破會(huì)越來越多，為臨床提供更多的有價(jià)值的質(zhì)譜檢測(cè)數(shù)據(jù)。（轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)網(wǎng)）
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